Objetivo
En esta práctica vamos a realizar una determinación de proteínas totales por el método de biuret
Fundamento
En medio alcalino, las proteínas dan un intenso color violeta azulado en presencia de sales de cobre; contiene yoduro como antioxidante. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de proteica total en la muestra ensayada
Materiales y reactivos
-->Gradillas
-->Tubos de ensayo
-->Espectrofotometro
-->Micropipetas y puntas
-->R(Biuret)
-->Protein cal
-->Muestra (Suero)
Procedimiento
1.Encendimos el espectrofotometro y seleccionamos la longitud de onda de 540nm
2.Preparamos el blanco, depositando 1ml de R
3.Preparamos en otro tubo el patrón, depositando 1 ml de R y 25 µl de protein cal
4.Preparamos el tubo de la muestra depositando 1 ml de R y 25 µl de la muestra.
5.Esperamos 10 min
6.Ajustamos el blanco en el espectrofotometro
7.Medimos el patrón
8.Medimos la muestra
Resultados
Patrón --> 0,623
Muestra Madeleine -->0,372
Muestra Ines --> 0,302
Mi muestra --> 0,342 --> 0,342/0,623 x 7 --> 3,8
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